目的:探讨人羊膜在制备和保存过程中的微生物安全性及其控制,为建立羊膜库提供便捷、有效的微生物控制方法。方法:20只“健康”剖宫产胎盘的羊膜取材后,均按不同的无菌处理程序和保存方法分组(生理盐水浸泡、不同浓度庆大霉素—两性霉素B溶液浸泡;DMEM 4oC、纯甘油4oC、纯甘油与DMEM 1:1混合-80 oC及真空干燥4oC保存)。检测时段分别为保存后24小时、1月、3月、1年,均作细菌、真菌、支原体检测。5只“健康”顺产胎盘的羊膜,用庆大霉素—两性霉素B溶液浸泡后,即时作细菌、真菌、乳酸菌、支原体检测。随访提供羊膜的25名产妇6个月,作血清学复查。结果:(1)仅用无菌生理盐水浸泡组中,有2只剖宫产胎盘的羊膜出现细菌污染(大肠埃希菌;大肠埃希菌、表皮葡萄球菌);(2)20只剖宫产胎盘的羊膜在其余各组中均未查出细菌、真菌、支原体污染;(3)有1只顺产胎盘的羊膜经抗生素液浸泡后,仍查出乳酸菌;(4)25名产妇6个月的血清学复查均为阴性。结论:以“健康”剖宫产产妇的胎盘为羊膜来源,是控制微生物安全的第一关。含1000 U/ml庆大霉素、2.5 μg/ml两性霉素B的医用无菌生理盐水作为制备羊膜时的抗生素浸泡液,便捷有效。严格无菌操作下的常用保存方法,可基本保证羊膜在1年保存期内免受微生物污染。
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