目的:探讨正常人结膜杯状细胞的体外培养方法,为体外研究杯状细胞生理、病理及药理提供基础。
方法:将外眼手术取下的正常球结膜,放在含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中以组织块培养法进行培养。通过光镜下细胞形态、特殊组化染色(AB-PAS)和免疫组化方法鉴定。
结果:结膜杯状细胞可在体外成功分离培养,培养后24小时可见细胞长出,6天后可形成细胞单层,并可传3-5代。倒置相差显微镜下可见细胞体积较大,含有粘蛋白颗粒。阿利新蓝/过碘酸-希夫试剂染色阳性;对特异识别杯状细胞的cytokeratin-7和MUC5AC单克隆抗体呈阳性反应,而对特异识别复层非角化上皮细胞的cytokeratin-13单克隆抗体呈阴性反应。
结论:杯状细胞可在体外培养,并保持在体特性,可为体外研究结膜杯状细胞特性提供模型。
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