目的 探讨不同阶段大鼠视网膜混合细胞对视网膜干细胞的特异性诱导分化效应,并分析其电生理学特性。方法 利用 Transwell系统,构建视网膜干细胞与不同阶段大鼠视网膜混合细胞共培养模型,观察不同阶段大鼠视网膜混合细胞对视网膜干细胞特异性诱导分化效应,实验分为视网膜干细胞10%胎牛血清诱导分化组、新生鼠视网膜混合细胞共培养组以及成年大鼠视网膜混合细胞共培养;利用膜片钳技术,对干细胞及分化后的细胞进行全细胞记录检测其电生理特性。结果 与血清诱导视网膜干细胞分化结果比较,新生大鼠视网膜混合细胞共培养可以诱导视网膜感光细胞的特异性抗原Opsin高表达(P<0.05);而成熟大鼠视网膜混合细胞共培养组Opsin表达与血清组无统计学差异(P>0.05);在干细胞及其分化后的细胞记录到不同的电压门控性电流。结论 新生大鼠视网膜混合细胞可能分泌某种物质,可以提高视网膜干细胞向光感受细胞的分化比率,而成熟大鼠视网膜混合细胞不具备此功能可能与该阶段细胞发育信号途径的关闭有关系;干细胞发育的早期阶段与其分化阶段拥有不同的电生理学特性,从细胞功能的水平阐述了该视网膜干细胞及其分化细胞的标志。 |