目的 将所构建的TGFβ2特异性dsRNA质粒载体转染体外培养的大鼠Tenon’s囊成纤维细胞,观察和研究其对大鼠Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2mRNA和蛋白表达的影响。
方法 将所提取的TGFβ2特异性dsRNA质粒载体,利用转染试剂siPORT TM XP-1对体外培养的大鼠Tenon’s囊成纤维细胞进行转染,采用RT-PCR技术研究不同浓度载体转染后对Tenon’s囊成纤维细胞的TGFβ2mRNA表达的影响;在载体转染浓度筛选实验的基础上,进一步研究相同浓度载体转染后不同时间对Tenon’s囊成纤维细胞的TGFβ2mRNA表达的影响;在上述实验的基础上,再对比研究构建载体与其它不同处理因素对Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2mRNA和蛋白表达的影响。
结果 将TGFβ2特异性dsRNA质粒载体转染体外培养的大鼠Tenon’s囊成纤维细胞后,其对Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2mRNA表达的抑制作用随浓度的增大而增强,同一浓度构建载体对成纤维细胞TGFβ2表达的抑制作用,随着转染时间的延长而增强;构建载体对Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2mRNA和蛋白表达的抑制作用较MMC为弱。
结论 所构建的TGFβ2 特异性dsRNA质粒载体能够抑制Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2的表达,这为研究所构建载体对Tenon’s囊成纤维细胞增殖的抑制作用提供了实验依据。
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