目的 研究高糖条件下培养的牛视网膜微血管内皮细胞、周细胞线粒体活性氧产生量的变化,研究导致此种变化的原因及所致影响,探讨糖尿病视网膜病变的发生机制。 方法 采用选择性培养方法培养牛视网膜微血管内皮细胞、周细胞,通过共聚焦显微镜检测不同葡萄糖浓度下内皮细胞、周细胞线粒体活性氧产生量的变化,同时采用流式细胞仪检测线粒体膜电位(MMP)、细胞死亡率(CDR)的变化,免疫组化、免疫荧光及RT-PCR检测不同葡萄糖浓度下培养细胞MnSOD、解藕联蛋白UCP1、2、3的变化。结果 (1)随着培养基中葡萄糖浓度的增加,内皮细胞、周细胞线粒体活性氧的产生呈增多趋势。(2)培养的视网膜微血管内皮细胞、周细胞表达UCP1、2,不表达UCP3,UCP2、MnSOD表达量随培养基中葡萄糖浓度的变化而变化。(3)随着培养基中葡萄糖浓度的增加,内皮细胞线粒体膜电位逐渐增加,细胞死亡率逐渐增多,而周细胞则无此变化趋势。结论 高糖条件下培养的视网膜微血管内皮细胞、周细胞线粒体活性氧产生增多,UCP2、MnSOD表达量增多;UCP2、MnSOD与活性氧的产生相互调节;内皮细胞、周细胞在高糖条件下表现出的不同特征,说明其在糖尿病性视网膜病变的发生中起着不同的作用。
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