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二甲基亚砜诱导培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡的实验研究
作者:彭坤  邢…  文章来源:武汉大学人民医院眼科 430060  点击数1935  更新时间:2004/5/14  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 探讨一种细胞分化诱导剂及端粒酶抑制剂诱导培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡的作用,为进一步探索PVR的发病机制及研发新型防治PVR药物提供理论依据。 方法 取原代培养的细胞分成实验组和对照组,实验组用不同浓度的DMSO0.5%、1%、2%、4%、分别作用于培养的人RPE细胞24h、48h、72h、96h,对照组用含10%小牛血清的DMEM继续培养,时间效应同实验组。用吖啶橙荧光染色和流式细胞仪观察细胞凋亡。 结果 吖啶橙染色观察,1%、2%、4%DMSO均可诱导RPE细胞凋亡,凋亡细胞表现为染色质呈致密浓染的块状或颗粒状荧光,非凋亡细胞呈均匀荧光染色。流式细胞仪检测0.5%DMSO作用下细胞凋亡率即有增加,1%DMSO作用24h时凋亡率(1.04±0.09)增加较对照组(0.43±0.05)有显著性意义(P<0.001),随作用浓度增加及作用时间延长,凋亡率增加越显著。4%DMSO作用96 h时凋亡率达最大值(15.91±2.29)。细胞周期分析1%DMSO作用72hG1期细胞百分率(50.15±2.38)增加较对照组百分率(42.59±1.76)有显著性意义(P<0.001),S期细胞百分率2%DMSO作用24h(27.01±2.92)较对照组百分率(32.09±1.85)减少有显著性意义(P<0.001),G2期细胞百分率1%DMSO作用96h(18.38±4.32)较对照组百分率(27.35±1.43)减少有显著性意义(P<0.001)。G1期细胞百分率增加,S期、G2期细胞百分率减少均呈剂量依赖性。 结论 二甲基亚砜能阻滞培养的RPE细胞于G1期,诱导RPE细胞凋亡,且呈剂量依赖性。
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