| 【目的】：本实验通过研究氟伐他汀对培养的人眼Tenon’s囊成纤维细胞增殖的影响，探讨他汀类药物用作青光眼滤过术辅助用药的可能性，为临床防治青光眼滤过术后滤过道阻塞提供新的可能的防治方法。
【方法】：1. 取在我院行滤过性手术的青光眼患者的Tenon’s 囊筋膜组织，采用组织块培养法进行原代培养并传代培养，用形态学及免疫组化染色法进行鉴定，取第3 -7代培养的细胞用于试验；
2. 取第3-7代培养细胞消化接种于96孔板，待细胞70%-80%融合生长后，按分组计划加入不同浓度的氟伐他汀（共8组：对照组、0.001μM、0.01μM、0.1μM、1.0μM、5.0μM、10.0μM、20.0μM），各浓度组均分别作用24小时、48小时、72小时，每组在三个作用时间分别设4个复孔(n=4)，采用四氮唑盐代谢法（MTT）测每孔的吸光度值（A），检测药物对细胞增殖的影响；
3. 取第3-7代的培养细胞，消化接种于铺有盖玻片的6孔板，培养24小时后，按分组计划加入不同浓度的氟伐他汀（共6组：0.01μM、0.1μM、1.0μM、5.0μM、10.0μM），作用72小时后固定爬片，用SABC免疫组化法进行PCNA染色，染色结果用计算机图文分析系统进行定量分析，测定各组细胞平均光密度值（A），比较不同浓度氟伐他汀对培养的人眼Tenon’s囊成纤维细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。
【结果】：1. MTT法示：氟伐他汀作用24小时后，浓度5.0μM及其以上的各实验组细胞数明显下降，统计学上，其吸光度值（A）与对照组比较差异有非常显著性；药物作用48小时后，浓度1.0μM及其以上实验组与对照组比差异有显著性；药物作用72小时后，0.1μM及其以上实验组与对照组比差异有显著性（p<0.05）；
2. PCNA免疫组化法：浓度0.1μM及其以上的氟伐他汀组PCNA表达水平皆低于阴性对照组，在统计学上，其细胞平均光密度值(A)与对照组比较有显著性差异（P<0.05）。
【结论】：氟伐他汀能抑制体外培养的人眼Tenon’s囊成纤维细胞的增殖，并呈现剂量、时间依赖性。认为氟伐他汀有望成为青光眼滤过性手术联合应用的新型抗瘢痕药物。
【关键词】：氟伐他汀； 青光眼； Tenon’s囊成纤维细胞
|
