| 【摘要】目的观察Nogo-66基因敲除成年大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞在体内和体外培养轴突的生长状态，评价Nogo-66基因在视神经损伤后修复机制中的作用。方法成年Wistar大鼠按损伤后存活时间不同分为实验组和对照组，Nogo-66基因敲除联合视神经损伤为实验组，Nogo-66基因未敲除联合视神经损伤作为对照组。制备视网膜、视神经冰冻切片，采用免疫荧光技术检测视网膜神经节细胞和视神经中生长相关蛋白-43的表达。进行视网膜神经节细胞体外培养，进行生长相关蛋白-43染色，采用图象分析系统计算细胞轴突长度。结果视神经中GAP-43表达：对照组中表达少量GAP-43，实验组中可见视神经中轴突显示GAP-43表达，GAP-43表达阳性轴突沿视神经生长。Thy1.1抗体染色可见着色在RGCs细胞膜和轴突。实验组3天有较长轴突生长，对照组3天有较短轴突生长。RGCs于培养1天、3天及7天，经自动图像分析系统处理，得出细胞突起长度。实验组及对照组培养不同时间RGCs突起长度不同，差异有极显著性（F=42.84，32.18； P＜0.01＝。结论Nogo-66基因在抑制视神经损伤后轴突的生长。体外培养实验组的视网膜神经节细胞轴突的生长，与对照组相比有显著差异。 |
