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羊膜基因保存库——基础研究和临床应用间的桥梁
作者:毕燕龙,…  文章来源:同济大学附属同济医院眼科,200065  点击数1085  更新时间:2006/5/16 10:09:23  文章录入:biyanlong  责任编辑:毛进
摘要 目的 观察目的基因在新鲜和保存羊膜中表达的完整性。方法 取新鲜羊膜深低温保存,以FDA/PI 和台盼蓝染色确定上皮细胞活性。用 real-time RT-PCR评估 TGFβ1、EGF、IL1β 和 IL1RA各阶段的表达能力,结果以2△△CT 表示。结果 深低温保存后,羊膜上皮细胞经染色证实全部死亡,但细胞培养3周后,会有大量的新生细胞游离出来。如羊膜解冻后立即行总RNA提取,在不同阶段保存羊膜中的总RNA 无明显减少,且目的基因的表达同新鲜羊膜中的相同(P>0.05)。如解冻半小时后提取总RNA,其量明显减少(P<0.01)。 结论 传统的羊膜深低温保存法可有效保护基因的完整性,据此我们提出一个羊膜基因保存库的新概念。
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