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近紫外线对兔晶状体上皮细胞通讯功能的影响及其机制的实验研究
作者:彭艳丽 李…  文章来源:重庆爱尔眼科医院(重庆市江北区建新南路11号) 400020  点击数918  更新时间:2006/6/1 10:59:22  文章录入:aya610  责任编辑:毛进
目的 探讨近紫外线照射对兔眼晶状体上皮细胞缝隙连接通讯功能的影响情况及其发生机制。 方法 兔晶状体前囊膜行组织块法细胞培养,给于同一强度不同时间(5min、10min、15min)的近紫外线照射,将其分为正常对照组和近紫外线照射组,采用荧光光漂白恢复技术检测各组晶状体上皮细胞荧光恢复率情况,从而客观反映细胞缝隙连接通讯功能的情况;应用Western-blot方法从翻译水平检测各组细胞Cx43蛋白表达;采用间接免疫荧光染色法对Cx43蛋白进行定位分析。以上所有实验数据均应用 SPSS13.0 统计学软件处理,结果以x±s表示,组间以方差分析进行处理。结果 正常对照组细胞平均荧光恢复率为58.337±5.620%, 随着照射时间的延长,近紫外线照射组细胞平均荧光恢复率逐渐下降,分别为34.205±3.652 %、18.809±3.017%、7.029±2.917%,与正常对照组相比有显著性差异(P<0.001);Western-blot结果显示:Cx43蛋白在各组晶状体上皮细胞中均有表达,并且正常对照组为高表达,随着近紫外线照射时间的增加,其Cx43蛋白的表达逐渐降低;Cx43荧光标记定位结果显示:经近紫外线照射后正常定位于晶状体上皮细胞膜上的Cx43发生了内移。结论 证实近紫外线照射能降低兔晶状体上皮细胞缝隙连接通讯功能,并且随着照射时间的增加,其功能下降越明显;其发生的机制可能与细胞缝隙连接通讯的关键蛋白Cx43表达的下降和功能定位的改变有关。
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