| 目的 研究Math5对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)分化的调控。
方法 分离培养E14 SD大鼠视网膜前体细胞(retinal progenitor cells, RPCs)，构建pIRES2-EGFP-Math5，以pIRES2-EGFP作为对照，转染RPCs，倒置相差显微镜每天观察RPCs的生长和分化情况，重点观察其向RGCs的分化，Thy1.1标记RGCs并进行计数。同时，用荧光定量RT-PCR的方法检测RPCs分化不同时间点Math5相关基因的表达情况。
结果 pIRES2-EGFP-Math5/pIRES2-EGFP能成功转染RPCs，转染效率为24.68%。转染后RPCs的生长不受影响，仍能分化为多种视网膜细胞类型，包括Thy1.1阳性的RGCs。A组(Math5质粒转染组)，B组(空质粒转染组)和C组(未转染质粒组)RGCs%分别为30.85%±6.28%，15.84%±3.55%和16.22%±3.60%， A组与B组、C组比较，差异有统计学意义（P<0.001）。Math5相关基因Delta-1、Hes1和Brn-3b在RPCs分化的不同时间点表达不同，pIRES2-EGFP-Math5转染RPCs不仅改变Delta-1、Hes1和Brn-3b基因的表达量，而且改变其表达曲线。
结论 Math5对RGCs的分化具有正向调控作用，过量表达Math5能促进RPCs向RGCs分化，并伴随相关基因的变化。 |
