| 目的：探讨PEDF-GFP基因转染对氪激光诱导的BN大鼠CNV的发生，发展过程的影响。方法：1．24只BN大鼠按数字随机分为6组，以脂质体介导的方法将重组表达质粒PEDF-GFP经玻璃体腔注射入BN大鼠眼内。在注射后1d、1w、2w、3w、4w分别用荧光显微镜观察GFP表达情况，用RT-PCR方法检测PEDF表达情况。2．48只BN大鼠行氪激光光凝诱导脉络膜新生血管，然后按数字随机分组为PEDF组、脂质体组和对照组。光凝后1w、2w、3w、4w分别行眼底血管荧光造影、脉络膜血管铺片、病理学检查，及PECAM-1表达的免疫组化检测，评价PEDF基因转染对氪激光诱导的CNV发生，发展过程的影响。结果：1．玻璃体注射脂质体介导的PEDF-GFP质粒后1d均可见明显的绿色荧光分布于视网膜全层，1周时表达更强，2周和3周时荧光强度比１周增强，荧光范围也有所扩大，可以持续表达4周。RT-PCR反应可以检测到转染后第1天PEDFmRNA表达就较对照组增强，第1周和第2周表达强度更高，到第4周注射组的视网膜组织中PEDFmRNA仍有较高水平的表达。2．PEDF组在每个时间点的荧光素渗漏范围均明显小于脂质体组和对照组。PEDF组光凝后4周，光凝区内增殖的RPE细胞、成纤维细胞和新生血管较少。3组光凝区均可见PECAM-1阳性表达，但PEDF组与对照组和脂质体组比较差异有显著性。PEDF组在每个时间点的CNV面积与对照组和脂质体组比较差异均有显著性。结论：玻璃体腔注射脂质体和质粒复合物能有效地转染视网膜全层，并可以持续表达。PEDF基因转染可以显著抑制氪激光诱发的BN大鼠的CNV。 |
