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层粘连蛋白对人晶状体上皮细胞蛋白激酶B活性的影响
作者:王欣玲  …  文章来源:中国医科大学附属第四医院眼科,辽宁,沈阳,110005  点击数944  更新时间:2006/6/7 20:42:18  文章录入:cmu4h-wxinling  责任编辑:毛进
目的:探讨层粘连蛋白(Ln)对传代培养的人晶状体上皮细胞(hLECs)的蛋白激酶B(PKB)活性的影响,以及Ln激活PKB的信号分子途径。 方法:选取第3~5代hLECs,在培养液中加入层粘连蛋白,终浓度为5μg/ml。分别在处理后0、10、20、40、60min取出细胞,[γ-32P]-ATP 掺入法测定胞膜和胞浆PKB比活性。以PI3K的特异性抑制剂wortmannin(终浓度100nM)预处理1h,再加入层粘连蛋白,0、10、20、40、60min测定胞膜和胞浆PKB比活性。 结果:hLECs胞膜和胞浆PKB比活性在层粘连蛋白作用的40min时达到最高值,分别为空白对照的2.72和2.00倍。层粘连蛋白处理的各组胞膜和胞浆PKB比活性显著高于对照组(P<0.05)。经wortmannin预处理后,再加入层粘连蛋白,胞膜和胞浆PKB比活性与未经预处理的各时间组相比均显著下降(P<0.05)。 结论:层粘连蛋白通过PI3K途径激活人晶状体上皮细胞的PKB活性,比活性随时间变化而发生改变。
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