| 目的 探讨LASIK与epi-LASIK术后兔角膜中神经生长因子（nerve growth factor, NGF）变化。 方法 健康新西兰白兔28只，其中4只做为正常对照，其余24只做为实验组。实验组白兔，随机选择一眼行LASIK，另一眼行epi-LASIK。两种手术的激光切削方案相同：光学区直径6mm，切削深度81µm（-5.0Ds）。分别在术后1天、3天、7天、1月，取角膜中央6mm区域，用于NGF免疫组化染色、Western blot检测NGF蛋白表达、RT-PCR半定量法检测角膜上皮与基质NGFmRNA表达。 结果 正常兔角膜中，NGF免疫阳性染色弱。Epi-LASIK术后1天，角膜上皮层NGF免疫阳性染色明显增多；术后3天，角膜上皮完全愈合，NGF免疫阳性染色仍较正常时稍多；术后7天、1月，角膜中NGF免疫阳性染色弱，与正常角膜接近。LASIK术后各时间点，角膜NGF免疫阳性染色弱，与正常角膜接近。Western blot结果示，Epi-LASIK术后各时间点，角膜NGF蛋白表达与正常角膜接近（P>0.05）。LASIK术后1天、3天，角膜NGF蛋白表达较正常对照少，差异有统计学意义（t=-12.52, -9.95; P=0.001）；术后7天、1月，角膜NGF蛋白表达与正常对照接近（P>0.05）。两种手术之间比较，术后1天、3天，LASIK组角膜NGF蛋白表达较epi-LASIK组少，差异有统计学意义（t=-6.50, -5.85; P=0.023, 0.028）。RT-PCR结果示，epi-LASIK术后1天、3天，角膜上皮NGFmRNA表达较正常对照多，1天时最明显，差异有统计学意义（t=9.88, 3.96; P=0.001, 0.021）。LASIK术后各时间点，角膜上皮NGFmRNA表达与正常对照接近（P>0.05）。两种手术之间比较，术后1天、3天，epi-LASIK组角膜上皮NGFmRNA表达较LASIK组多，差异有统计学意义（t=6.86, 6.82; P=0.021, 0.021）。epi-LASIK术后1天，角膜基质NGFmRNA表达较正常对照多，差异有统计学意义（t=5.25, P=0.006）。LASIK术后各时间点，角膜基质NGFmRNA表达与正常接近（P>0.05）。两种手术之间比较，术后1天，epi-LASIK组角膜基质NGFmRNA表达较LASIK组多，差异有统计学意义（t=26.1, P=0.001）。 结论 epi-LASIK术后早期角膜上皮NGFmRNA及其蛋白表达增高，可能与角膜神经再生以及角膜知觉的维持有关。LASIK术后早期角膜中NGF蛋白表达下降，可能是角膜神经大范围受损所致，与术后早期角膜知觉严重下降以及角膜神经修复缓慢可能有关。 |
