| 目的 视网膜脱离和眼内增生性病变形成时，视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelial cells, RPEs）层可能会受到牵拉力的作用。本实验旨在观察培养人RPE细胞在受机械牵拉力时基质金属蛋白酶表达的变化。方法 将胶原包被的磁珠悬液加入培养人RPE细胞后孵育，附着磁珠的细胞放置在恒定磁场中。在不同时间点，分别用RT-PCR和WESTERN BLOT的方法检测RPE细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-2和FN mRNA和蛋白的表达,用明胶酶谱的方法检测活性MMP-2和MMP-9的变化，用ELISA检测培养液中MMP-2的表达变化。此外，观察p38的特异性阻断剂SB203580对牵拉力作用的RPE细胞表达MMPs的影响。结果 RPE细胞有MMP-2、MMP-9、TIMP-2、FN的表达。牵拉15min后FN mRNA的表达就开始升高，4h后MMP－2 mRNA水平升高。12h MMP-2蛋白水平升高，而FN的蛋白表达在牵拉12h内未见升高。SB203580能够抑制牵拉后MMP-2和FN表达的上调。牵拉12h内未见MMP-9和TIMP-2表达的变化。结论 机械牵拉可以增加RPE细胞MMP-2和FN的表达，从而直接破坏了MMPs和TIMPs的平衡。这一因素可能在视网膜脱离或眼内增生性疾病的发生中起重要作用。 |
