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米诺霉素通过p38 MAPK 通路抑制LPS诱导的视网膜小胶质细胞的活化
作者:杨丽萍\朱…  文章来源:北京大学眼科中心,北京大学第三医院, 100083  点击数1722  更新时间:2006/6/21 14:36:45  文章录入:lipingyang2006  责任编辑:毛进
实验目的:探讨米诺霉素是否能抑制LPS诱导的视网膜小胶质细胞的活化过程,并探讨其作用机制。 实验方法:细胞免疫荧光染色、RT-PCR、Western Blotting和Elisa等 实验结果: 1. 体外培养的小胶质细胞表达其特异性标记物CD11b,细胞纯度达95%; 2. 先将小胶质细胞与米诺霉素孵育1小时,再将细胞暴露于LPS,可明显抑制LPS诱导的小胶质细胞的形态改变; 3. 先将小胶质细胞与米诺霉素孵育1小时,再将细胞暴露于LPS,可明显抑制LPS诱导的小胶质细胞中iNOS mRNA的表达以及NO的分泌; 4. 先将小胶质细胞与米诺霉素孵育1小时,再将细胞暴露于LPS,可明显抑制LPS诱导的小胶质细胞中eotaxin, rantes 和IL-10 mRNA的表达,而对MCP-1, MCP-3, MIP-1α, MIP-1β和 rantes 的表达无明显的抑制作用; 5. 先将小胶质细胞与米诺霉素孵育1小时,再将细胞暴露于LPS,可明显抑制LPS诱导的小胶质细胞中p-p38 MAPK的表达,而对NF-κB的p65 亚单位, p-p44/42 and p-JNK MAPKs的表达无明显的抑制作用; 实验结论: 1. 小胶质细胞在静息状态下即分泌多种细胞因子,活化后其分泌细胞因子和NO量明显增多; 2. LPS可通过NF-kB和MAPKs两条通路诱导小胶质细胞活化; 3. 米诺霉素可抑制LPS诱导的视网膜小胶质细胞的活化过程,这一抑制作用主要是通过p38 MAPK 通路实现的。
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