目的:观察双层胶联羊膜移植治疗兔深层角膜损伤后的组织病理学转归,揭示AMT术后双层羊膜植片与角膜的组织结构关系,为临床双层胶联羊膜治疗角膜深层溃疡提供依据。
方法:新西兰大白兔45只,随机分为3组,每组15只。A组:双层胶联羊膜移植组;B组:单层羊膜移植组;C组:非移植对照组。制作兔角膜中央7.5mm直径1/2角膜厚度的创伤。用8.0mm的环钻分别钻取胶联羊膜和单层羊膜植片,将羊膜片间断缝合于角膜植床12针,并在角膜表面再覆盖一单层羊膜固定于浅层巩膜。C组只在角膜表面覆盖一单层羊膜后缝合固定于浅层巩膜。术后常规滴用抗生素眼液,每天用裂隙灯观察羊膜溶解脱落情况、荧光素染色。术后第7、14、28天,每组分别处死5只动物,取其眼球行组织病理学和透射电镜检查。
结果:A组与B、C组在损伤愈合时间上存在显著差异,其中A组愈合时间最短,平均为15.25±2.221天。组织病理学结果显示:7天各组创缘交界处上皮细胞增殖分化现象明显,A组可见增生的角膜细胞沿胶联羊膜的表面以及羊膜与胶之间的潜在间隙移行。14天时,A组可见纤维蛋白胶完全降解,创伤处新生的复层角膜上皮将羊膜完全覆盖,羊膜不引起基质新生血管和炎症反应,角膜中央厚度已恢复正常。28天时,整合于角膜基质中的双层羊膜为均一基质,无细胞结构,无明显吸收降解,其周围有增殖的角膜细胞和胶原,角膜无新生血管。而B、C组未见明显的羊膜整合现象,角膜损伤以瘢痕愈合,粗大新生血管长入。电镜结果显示:A组14天时已形成4-6层角膜上皮结构,并形成大量桥粒连接;28天时可见胶原纤维排列整齐、上皮基底柱状细胞与下方角膜基质形成半桥粒连接。
结论:双层胶联羊膜移植可以显著缩短角膜深层损伤愈合的时间。双层羊膜完全被复层角膜上皮所覆盖,具有整合于角膜基质的趋势。双层胶联羊膜移植可以作为临床上无角膜供体来源时治疗角膜溃疡或穿孔的有效治疗手段。
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