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高糖环境下视网膜血管周细胞内β1,4半乳糖基转移酶表达的改变 |
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作者:刘堃 叶纹… 文章来源:复旦大学附属华山医院 200040;上海交通大学附属第一人民医院 200080 点击数:840 更新时间:2006/6/26 23:24:16
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视网膜血管周细胞的凋亡是糖尿病性视网膜病变的早期表现之一,引起周细胞的凋亡的机制目前尚不完全明了。β1,4半乳糖基转移酶是研究较早的一种糖基转移酶,参与蛋白翻译后修饰等多种生理功能,目前许多研究表明细胞内β1,4半乳糖基转移酶上调与细胞凋亡相关,有研究发现非酶糖基化产物(AGEs)能上调细胞内半乳糖基转移酶的活性。【目的】:本研究的目的是了解高糖环境下牛视网膜血管周细胞内β1,4半乳糖基酶的表达情况以及细胞凋亡情况。【方法】:原代培养牛视网膜周细胞,采用高糖培养基(葡萄糖浓度为30mmol/LDMEM培养基)培养24、48,72小时,以葡萄糖浓度为5mmol/LDMEM培养基培养作为正常对照,甘露醇作为渗透压对照。采用RT-PCR,细胞免疫组织化学和免疫印迹法分别在RNA和蛋白水平观察高糖培养下β1,4半乳糖基酶的改变情况;同时采用流式细胞仪,hoechst染色分别观察高糖培养24、48和72小时后细胞凋亡的情况。【结果】:通过以上三种不同的检测方式均证实了,在高糖培养环境下,培养24小时后细胞内β1,4半乳糖基酶的表达即上调;同时,高糖培养72小时后周细胞的凋亡上升。【结论】:高糖环境下,牛视网膜血管周细胞内β1,4半乳糖基转移酶的表达上调,其可能参与了高糖环境下的周细胞的凋亡,其参与机制有待进一步明确。 |
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会议投稿录入:drbarton 责任编辑:毛进 |
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