目的 研究溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid, LPA)和转化生长因子β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)对体外培养的恒河猴视网膜色素上皮细胞(rhesus retinal pigment epithelium, rRPE)吞噬功能的影响。方法 取健康的成年恒河猴眼球,用酶消化法获取RPE细胞,含15%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养,细胞接近融合时进行传代。取第3代细胞进行实验。用LPA和TGF-β1共培养,采用MTT法检测细胞的增殖活力,流式细胞术检测细胞周期并固定行透射电镜检查。将细胞培养至第3代,倒置相差显微镜下观察细胞内没有色素后,加入外源色素用酶联免疫检测仪定量分析吞噬能力。结果 加药第二天开始TGFβ1组吸光度明显低于对照组(P <0.05), LPA组吸光度明显高于对照组(P <0.05)。TGFβ1组G1期细胞数明显高于对照组(P <0.05),G2/M期细胞数低于对照组(P <0.05),而S期没有明显变化(P﹥0.05)。 LPA组G1期细胞数明显低于对照组(P <0.01),S期细胞数明显高于对照组(P <0.01),而G2/M期没有明显变化(P﹥0.05)。TGF-β1及LPA对rRPE细胞吞噬功能与对照组相比均无明显区别(P﹥0.05)。对照组与LPA组细胞超微结构无明显异常改变。TGF-β1组大多数细胞结构无明显异常,部分细胞见胞核呈分叶状。染色质呈团块状分布,部分细胞见较多的内质网或线粒体扩张,但未见细胞坏死或凋亡小体。加入色素组的细胞内可见大量的色素,部分细胞内见消化不完全的色素颗粒。结论 LPA同时作用于rRPE细胞周期的G1→S转折点和G2→M转折点,促进细胞的增殖。其对细胞的超微结构和吞噬功能没有明显影响。TGF-β1是rRPE细胞增殖的抑制因子,其作用点主要在G1→S转折点,对G2→M转折点可能也有一定的抑制作用。同时,TGF-β1
可能对细胞有一定的毒性作用,可能促进rRPE细胞的凋亡,但细胞的吞噬功能正常。
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