|
| 人骨髓来源的间充质干细胞重建大鼠化学烧伤眼表的研究 |
|
作者：徐永胜 王… 文章来源：北京大学第三医院眼科 北京大学眼科中心 100083 点击数：897 更新时间：2006/6/28 9:19:57 
|
|
| 目的： 探讨以羊膜为载体的人骨髓间充质干细胞对大鼠眼表碱烧伤是否具有修复作用以及作用机理，试图为眼表重建手术提供新的实验理论基础。
方法： 将成人骨髓通过密度梯度离心法分离提取间充质干细胞,培养扩增并进行鉴定，包括流式细胞术检测表面细胞标志（CD34、CD38、CD45、CD147、HLA-DR、CD71、CD44、CD90），以及分化鉴定：成骨诱导分化、成软骨诱导分化、成脂肪诱导分化。碱烧伤SD大鼠的右眼眼表，建立眼表损伤动物模型，进行治疗研究。按治疗方式不同实验分为六组：人骨髓间充质干细胞移植组、人角膜缘干细胞移植组、人成纤维细胞移植组、人羊膜移植组、地塞米松药物治疗组、单纯损伤无治疗组。所有大鼠左眼作为空白对照不予任何处理。人骨髓间充质干细胞，人角膜缘干细胞以及人成纤维细胞均以羊膜为载体，当细胞密度达到90%以上时移植于烧伤7天后的大鼠右眼眼表，羊膜移植组采用单纯羊膜移植。所有六组大鼠均在移植后缝合眼睑。术后十天打开眼睑，六组大鼠均滴用抗生素眼药水预防感染，除单纯损伤无治疗组外其余各组均使用地塞米松眼药水。术后采用裂隙灯对大鼠的术眼进行观察，对眼表恢复情况进行评估。术后4周将大鼠过量麻醉致死，取术眼角膜经4%多聚甲醛固定、切片、HE染色观察角膜修复情况，免疫荧光法染抗人核抗体检测细胞的存活情况，同时检测作为角膜上皮细胞的标记keratin3, keratin pan以及与炎症有关的CD45、interleukin-2和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)。
结果：通过系列鉴定证明获得成人骨髓间充质干细胞，并在羊膜上培养成功。与人成纤维细胞移植组、人羊膜移植组、地塞米松药物治疗组、单纯损伤无治疗组比较，治疗后裂隙灯照相显示，人骨髓间充质干细胞移植治疗组的大鼠眼表体征明显好转，包括新生血管明显减少、上皮光滑、角膜透明，恢复情况接近于人角膜缘干细胞移植治疗组的大鼠眼表。角膜上皮细胞的标记keratin3和 keratin pan检测为阴性，表明人骨髓间充质干细胞并没有分化成为角膜上皮细胞，只是呈上皮样细胞形态。而炎症有关的CD45、interleukin-2和MMP-2检测结果显示人骨髓间充质干细胞、人角膜缘干细胞移植组对眼表炎症的控制效果均优于其它各组。
结论： 本研究成功地从成人骨髓中分离获得纯度较高的MSCs，并可在体外培养、增殖多代，该细胞具有自我更新能力，且具有多向分化潜能，在不同的体外诱导条件下，可以向成骨细胞，成软骨细胞，成脂肪细胞分化；以羊膜为载体的MSCs对大鼠烧伤眼表有一定的修复作用；移植于大鼠烧伤眼表的MSCs成功存活，同时在位存活的MSCs在特定的微环境中未能分化为成熟的角膜上皮细胞；作用机理研究发现，MSCs对抑制炎症方面起着重要的作用。
|
|
|
| 会议投稿录入：yongsheng_xu 责任编辑：毛进 |
|
|
上一篇会议投稿： 玻璃体手术中一期人工晶体植入术的临床疗效观察
下一篇会议投稿： 软性角膜接触镜镜片含水量对对比度视力的影响 |
|
|
| 【字体：小 大】【发表评论】【加入收藏】【告诉好友】【打印此文】【关闭窗口】 |
|
网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！）