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| 色素上皮衍生因子在人晶状体上皮细胞的表达及其相关的生理病理因素 |
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作者：刘恬 刘奕… 文章来源：中山大学中山眼科中心 510060 点击数：978 更新时间：2006/6/29 20:50:56 
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| 目的
观察PEDF在人晶状体内的表达及分布，探讨人LEC中PEDF基因和蛋白的表达水平与年龄、白内障发生发展及相关病理情况的关系。
方法
⑴收集老年性白内障和先天性白内障患者超声乳化术中所取前囊膜的冰冻切片及漂片铺片标本，新鲜眼库眼透明晶状体的冰冻切片标本，常规培养的永生性人晶状体上皮细胞系（SRA01/04）的细胞铺片标本，用间接免疫荧光组织化学法检测PEDF蛋白在人晶状体中的分布及LEC中的表达。
⑵收集老年性白内障、先天性白内障、新鲜眼库眼透明晶状体的前囊膜样品，常规培养的SRA01/04细胞样品，按透明晶状体、轻度白内障、重度白内障、低龄、高龄、细胞系分组，分别用蛋白质免疫印迹（Western Blot）及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组人LEC中PEDF蛋白和基因的表达水平，并进行比较分析。
⑶选择同一年龄段（60～70岁）老年性白内障，包括单纯白内障、合并眼轴过长、合并糖尿病的情况，部分单纯白内障又按LOCSⅢ系统分4类型（C、N、P、M），用Western Blot法检测并分析各组前囊下LEC中PEDF蛋白表达水平。
结果
⑴首次显示人晶状体中存在PEDF蛋白，主要分布于前囊下LEC胞浆中，透明及混浊晶状体的LEC中均有表达，而活跃增殖的SRA01/04细胞中无PEDF表达。
⑵首次揭示人LEC内PEDF基因及蛋白的表达水平在晶状体由透明变混浊及混浊由轻变重的过程中呈显著下调的趋势（P均<0.01）。
⑶首次揭示人LEC内PEDF基因及蛋白的表达水平随着机体的衰老显著下调（P<0.001）。
⑷糖尿病等病理因素可影响LEC的PEDF表达（P<0.001），而眼轴因素不影响。
⑸不同病理类型白内障的LEC中PEDF表达水平无差异。
结论
人LEC中存在PEDF的基因及蛋白表达，提示LEC内也有PEDF的合成和活性。随着晶状体的衰老、白内障的发生发展、以及糖尿病等病理因素的影响，LEC中PEDF的表达水平呈显著下降，提示晶状体内PEDF的表达除了抑制血管生成的作用，还可能与LEC的细胞周期、细胞寿命、细胞保护等有关，推测PEDF适度表达参与了晶状体性状及防御等有关的生理机制，而PEDF表达下调很可能也是LEC衰老凋亡及白内障发生发展的重要因素或指标。
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| 会议投稿录入：liutian 责任编辑：毛进 |
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