| 目的 建立高效液相色谱法测定新西兰大白兔眼玻璃体两性霉素B。
方法 兔眼玻璃体标本100μL经过冷冻干燥后，加入乙睛-水（70：30）20μL去蛋白并溶解浓缩回收目标药物，13000rcf离心5min,取10μL进行样本色谱分析。色谱条件为流动相乙睛-10mMNaH2PO4溶液（35：65），流速0.20mL/min, C18色谱柱，柱温25℃，检测波长410nm。 结果 两性霉素B在3~500ng/mL内线性关系良好（r=0.99883），高、中、低三种浓度的方法回收率为(99～108)%，绝对回收率为(83～93)%;日内、日间RSD分别为(3.1～12.6)%、（3.8～12.9）%；检测灵敏度1ng/mL。 结论 标本前处理方法可以有效去除生物基质中的蛋白，同时保证了理想的回收，不对色谱柱造成损害，适用于兔眼玻璃体两性霉素B的定量分析,过程简单，方法稳定，结果可靠。 |
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