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| Notch信号系统在RA定向诱导胚胎干细胞分化为神经细胞过程中的时空表达 |
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作者：肖迎，唐… 文章来源：中山大学中山眼科中心 510060 点击数：1425 更新时间：2004/5/28 
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| 目的：研究全反式维甲酸（RA）体外诱导小鼠胚胎干细胞（ESC）向神经细胞定向分化过程中Notch信号系统的时空表达情况，探讨ESC定向诱导分化的分子机制。 方法：选取第10代BABL/C小鼠ESC，常规培养传代后，应用拟胚体（EB）培养基培养EB至第4天，将EB消化打散，于培养基内加入5×10-7mol/L RA进行诱导分化。分别取ESC、3.5天EB细胞、RA诱导分化3天、5天和8天的细胞，免疫细胞化学法检测神经干细胞特异性标志Nestin、成熟神经细胞特异性标志MAP-2的表达，免疫细胞化学以及Western Blot法观察Notch1信号蛋白的表达水平，RT-PCR法检测Notch1下游促神经发生因子bHLH家族成员Mash1、NeuroD的mRNA表达水平。 结果：ESC细胞Nestin和MAP-2表达均呈阴性；3.5天EB细胞Nestin表达阳性，MAP-2表达阴性；RA诱导分化后3天、5天和8天，Nestin表达均呈阴性，而MAP-2阳性细胞不断增加。Notch1蛋白在ESC中呈高表达，EB阶段表达水平降低（P＜0.05），RA诱导分化3天后明显降低（P＜0.01），5天消失，而其下游因子Mash1、NeuroD的mRNA于RA诱导分化5天时开始表达，8天时表达增强（P＜0.05）。 结论: RA可在体外将ESC定向诱导分化为神经细胞，Notch信号在ESC定向诱导分化过程中迅速关闭，同时开启其下游的bHLH信号系统，以促进神经元发生。Notch信号系统的时空变化可能是RA诱导ESC定向分化为神经细胞的分子机制之一。 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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