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| 人胚胎视网膜干细胞与皮质神经干细胞在不同培养条件下细胞增殖与分化的比较 |
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作者：康前雁*，… 文章来源：西安交通大学医学院神经科学研究中心，*西安交通大学第一医院眼科 710061 点击数：1991 更新时间：2004/5/29 
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| 目的: 比较人胚胎视网膜干细胞与人胚胎脑皮质神经干细胞在含与不含bFGF培养条件下细胞增殖与分化的变化。方法: 分离8-18周人胚胎眼神经视网膜及脑皮质，获得视网膜神经干细胞及皮质神经干细胞，分别置于含有N2添加剂有或无bFGF的DMEM/F12培养基中培养。培养5天及84天行免疫荧光染色检测神经干细胞特异性标志nestin、视网膜干细胞标志Pax6及成熟神经元标志Map2、胶质纤维酸性蛋白GFAP等抗原表达；培养10天行电镜观察在不同培养基中两种神经干细胞的超微结构变化；培养10天行流式细胞仪DNA染色法检测两种神经干细胞分别处于不同细胞周期的细胞百分比。结果: 视网膜神经干细胞及皮质神经干细胞均能够在含有N2添加剂有或无bFGF的DMEM/F12培养基中悬浮生长，并能形成表达nestin及Pax6神经球样结构，具有体外扩增传代及分化为神经元和神经胶质样细胞的能力，84天时细胞形态更加明显。视网膜干细胞更易在无生长因子培养基中存活，并长时间维持未分化状态。电镜观察显示其具有大细胞核、常染色质丰富等幼稚细胞特性。流式细胞仪DNA染色法显示无bFGF培养的视网膜神经干细胞G2/M期细胞(正在分裂和将分裂的细胞数)占5.71%,含bFGF培养的视网膜神经干细胞G2/M期占1.84%,皮质神经干细胞G2/M期占5.40%，表明无bFGF培养的视网膜神经干细胞细胞增殖能力较旺盛。结论: 人胚胎视网膜干细胞与皮质神经干细胞能够在含有N2添加剂有或无bFGF的DMEM/F12培养基中悬浮生长，增殖传代并具有向神经元分化的潜能。在无生长因子培养基中视网膜神经干细胞较皮质神经干细胞更易存活，维持未分化状态且增殖能力较旺盛。 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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