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| 促红细胞生成素与促红细胞生成素受体在大鼠脱离视网膜中的表达 |
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作者：解正高 … 文章来源：上海交通大学附属第一人民医院眼科 200080 点击数：1170 更新时间：2007/5/4 0:47:36 
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| 目的 过去认为促红细胞生成素（EPO）是机体处于缺氧状态下由胚胎肝脏和成人肾脏分泌的促红细胞生成因子。近来，研究证明EPO与其受体结合后通过抗凋亡机制不仅具有促进红系祖细胞增殖、分化的作用，也具有保护神经元的作用。随后的研究证实EPO和促红细胞生成素受体（EPOR）也表达于中枢神经系统、心脏、肺、胰腺、肌肉等组织中。人胚胎和成体神经视网膜同样存在EPOR。EPO是低氧诱导因子（HIF）的靶基因之一，视网膜缺氧预处理后HIF、EPO和EPOR表达均上调。视网膜脱离（RD）是广义的缺血缺氧性视网膜疾病之一，脱离后的外层神经视网膜发生缺氧。然而，目前国内外尚无关于RD后EPO和EPOR表达情况的研究报道，因此本研究目的就是通过建立大鼠RD模型，以了解RD后EPO和EPOR表达情况。
方法 48只大鼠随机平均分为正常对照组、RD 后1、3、6、12、24、48、72 h组，每组6只（12眼）。采用视网膜下腔注射1.4%透明质酸钠建立视网膜脱离模型，分别于不同时间采用RT-PCR和Western-blot方法检测EPO和EPOR的mRNA和蛋白水平表达的变化，同时采用免疫组织化学方法观察EPO和EPOR在视网膜中定位表达的情况。
结果 1. EPO和EPOR的mRNA表达：EPO的mRNA表达随视网膜脱离时间的延长逐渐增强，RD后48 h达高峰，是正常表达水平的2倍，随后降低。方差分析结果显示RD后12 h起EPO的mRNA表达水平显著高于正常对照组（P<0.05）。EPOR的mRNA表达也随视网膜脱离时间的延长逐渐增强，同样也是RD 48 h达高峰，是正常表达水平的6倍，随后也降低。方差分析结果显示RD后6 h起EPOR的mRNA表达水平显著高于正常对照组（P<0.05）。2. EPO和EPOR蛋白的表达：EPO的表达随视网膜脱离时间的延长逐渐增强，RD后48 h达高峰，是正常表达水平的2倍，随后降低。方差分析结果显示RD后3 h起EPO的表达水平显著高于正常对照组（P<0.05）。EPOR的表达也随视网膜脱离时间的延长逐渐增强，同样也是RD后48 h达到高峰，是正常表达水平的5倍，随后也降低。方差分析结果显示RD后3 h起EPOR的表达水平显著高于正常对照组（P<0.05）。3. 免疫组化检测结果：免疫组化结果显示，正常视网膜的节细胞层、内丛状层、内核层、外丛状层、外核层及感光细胞的内节均呈弱棕色着染，即有EPO的表达；RD后72 h在上述相同部位呈EPO表达强阳性着染。同样正常视网膜的节细胞层、内丛状层、内核层、外丛状层、外核层及感光细胞的内外节均呈EPOR弱棕色着染，RD后48 h在上述相同部位呈EPO强阳性着染。
结论 RD后大鼠视网膜EPO和EPOR表达均增强并具有时间依赖性，48 h达到高峰；大鼠神经视网膜大部分层次均能表达EPO和EPOR。
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| 会议投稿录入：xiezhenggao 责任编辑：毛进 |
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