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| Notch1信号分子在不同培养时间胚胎干细胞中的表达差异 |
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作者：肖迎，唐… 文章来源：山东省立医院眼科，山东省济南市经五纬七路324号 250021 点击数：1001 更新时间：2007/5/29 20:20:20 
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| [目的] 观察体外不同培养时间小鼠胚胎干细胞（embryonic stem cells，ESC）中，视网膜发育相关跨膜信号分子Notch1蛋白和mRNA的表达差异，探讨ESC向神经细胞定向分化的可能性，并寻找利用ESC进行视网膜定向诱导分化和视网膜早期发育基因相关研究的合适时机。
[方法] 分别取体外培养第12代（P12）、20代（P20）、28代（P28）的ESC，秋水仙素法进行ESC染色体核型分析，α-萘基磷酸法检测碱性磷酸酶（AKP）活性，免疫细胞化学、流式细胞仪和Western Blot法检测Notch1蛋白的表达水平，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测Notch1 mRNA的表达。
[结果] 三组体外不同培养时间的ESC均具有80％以上的正常染色体核型比例，AKP染色均为强阳性。Notch1蛋白及mRNA在P12 ESC中为高水平表达，但其表达水平均随培养时间的延长和传代次数的增加而显著降低(P<0.05)。
[结论] 体外培养时间较短的ESC有着高度的向神经链系定向分化发育的可能性。随着培养时间延长和传代次数增多，Notch1信号逐渐下调，ESC自发分化和成瘤的可能性增加，向神经细胞定向分化的潜能有所下降。在应用ESC进行视网膜定向诱导分化和视网膜发育相关调控基因等研究时，应尽可能选择体外培养时间短、传代次数少、干细胞特性维持较好的干细胞。
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| 会议投稿录入：drwqxy 责任编辑：毛进 |
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