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| rhTGF-β1及TGF-β1基因转染对兔角膜内皮细胞生物学活性的影响 |
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作者：马慧香,徐… 文章来源：温州医学院附属眼视光医院 325000 点击数：947 更新时间：2007/5/30 14:24:31 
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| 目的 探讨不同浓度的重组人转化生长因子-β1（recombination human transformation growth factor-β1, rhTGF-β1）及TGF-β1基因转染对体外培养兔角膜内皮细胞生物学活性的影响。方法 用MTT法检测不同浓度rhTGF-β1作用下角膜内皮细胞的增殖。用脂质体介导转染方法，将TGF-β1基因转移入培养的兔角膜内皮细胞，HE染色法观察细胞组织形态学变化；ELISA法检测转染细胞培养上清中TGF-β1表达量；流式细胞仪检测细胞生长周期变化；DNA电泳法检测转染细胞凋亡情况。结果 MTT检测示20～5ng/ml rhTGF-β1抑制角膜内皮细胞增殖，其中10ng/ml组抑制作用最强，20ng/ml组抑制作用减弱；1～0.5ng/ml组对增殖无影响；0.1～0.05ng/ml组促进细胞增殖。HE染色显示基因转染组角膜内皮细胞形态无明显异常。ELISA法得出线性回归方程：OD＝0.001C－0.0344（R＝0.998），并计算出基因转染组细胞培养上清中TGF-β1的浓度约为98±3pg/ml。流式细胞仪检测结果示，基因转染组S期和G2/M期细胞比例减少，增殖指数（proliferation index，PI）降低，但在培养液中加入表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）后细胞生长基本正常。DNA电泳检测显示基因转染组未见凋亡带（Ladder带纹）。结论 rhTGF-β1对角膜内皮细胞增殖的影响具有剂量依赖性；脂质体介导TGF-β1基因转染影响角膜内皮细胞的增殖、分化，但未诱发细胞凋亡，EGF可拮抗其抑制增殖作用。
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| 会议投稿录入：mahuixiang 责任编辑：毛进 |
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