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胶联羊膜的制备及临床前研究 |
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作者:赵敏 柯… 文章来源:重庆医科大学附属第一医院眼科 400016 点击数:1096 更新时间:2007/5/30 21:34:07
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目 的
研究胶联羊膜的制备和保存、组织形态学、生物力学性能及体外细胞相容性。探讨该材料用于眼表移植的可行性和优越性。
研究分:胶联羊膜的制备及形态学观察,胶联羊膜的生物力学性能评价,胶联羊膜的体外细胞相容性研究,胶联羊膜的保存条件初步研究。
方 法
一:将羊膜和纤维蛋白胶粘合制备成胶联羊膜,取新鲜胶联羊膜,大体观察,手术显微镜下观察,组织学切片,HE染色光镜观察。
二:随机选12片胶联羊膜行一维拉伸性能测试,以单层羊膜和双层羊膜作对照,得出抗拉强度、断裂伸长率、弹性模量及应力-应变曲线等。
三:以单层胶联羊膜为载体行角膜上皮细胞培养,观察培养细胞形态,网格样目镜观察不同时间的细胞生长覆盖面积,以去上皮羊膜为载体的细胞培养作对照。
四:以无水丙三醇4℃保存胶联羊膜。取保存20d和40d的胶联羊膜,行大体观察、组织学切片HE染色观察,以新鲜的胶联羊膜为对照。取保存6月的单层胶联羊膜,扫描电镜观察表面情况,以新鲜的胶联羊膜为对照。对无水丙三醇4℃保存1月的纤维蛋白胶的保存液测定蛋白浓度。
结 果 一:胶联羊膜的厚度约为0.1-0.3㎜,手术显微镜下难以分开,组织切片示羊膜、纤维蛋白胶结构完整,粘合紧密。羊膜与胶间无明显空隙,未见羊膜皱缩,中间纤维蛋白均一,未见分层和变性。二:胶联羊膜的抗拉强度、断裂伸长率较单层羊膜和双层羊膜明显增加,胶联羊膜的弹性模量小于单层羊膜和双层羊膜(P<0.01)。三:角膜缘上皮细胞7d左右在胶联羊膜上形成单层上皮细胞。实验组与对照组比较细胞生长覆盖面积第2d至第7d差异有显著性(P<0.05)。四:无水丙三醇4℃保存20d和40d的胶联羊膜较新鲜胶联羊膜稍薄,组织切片示羊膜有一定缩水,但羊膜与胶粘合紧密。保存6月的胶联羊膜外观完整,其纤维蛋白胶面的纤维网状结构较模糊;而新鲜的胶联羊膜纤维蛋白胶面可见突起的纤维网状结构。无水丙三醇4℃保存1月的纤维蛋白胶有部分降解。
结 论 1、羊膜和纤维蛋白胶可结合制成胶联羊膜,该材料粘合紧密,镜下形态规则。2、胶联羊膜具有良好的生物力学特性,其柔韧性和可塑性优于单层羊膜和双层羊膜。3、胶联羊膜可作为上皮细胞种植的载体,但此方面还需进一步研究。4、无水丙三醇可用于保存胶联羊膜,但何种温度及条件下其保存效果最佳有待进一步研究。
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会议投稿录入:minifish 责任编辑:毛进 |
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