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| 糖皮质激素对角膜上皮细胞和角膜成纤维细胞TLRs的表达和功能的调控 |
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作者：晋秀明，… 文章来源：温州医学院附属眼视光医院 325027 点击数：1194 更新时间：2007/5/31 14:10:21 
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| 目的：评估糖皮质激素对人角膜上皮细胞和角膜成纤维细胞的Toll样受体(Toll-like receptors，TLRs)表达和功能的影响。
方法：使用三种不同浓度的氢化可的松（1，10，100μg/ml）去刺激培养的人角膜上皮细胞系和角膜成纤维细胞，用RT-PCR和Real-time PCR来检查TLR1-10的mRNA的表达，以及这种表达在不同浓度氢化可的松干预下的变化情况。用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assays，ELISA)来检测两种培养细胞在正常状态下和氢化可的松干预下的IL-6，8的释放。TLR2，3，4，9蛋白水平的表达使用荧光免疫组织化学和western blot来检测。
结果：人角膜上皮细胞系和角膜成纤维细胞均表达TLR1-10 mRNA，两种细胞表达的TLRs的量存在差异性，人角膜上皮细胞系TLR1，3，4高表达，TLR7，8，9，10低表达；而人角膜成纤维细胞TLR4高度表达，TLR7，8，9，10，2表达量相当低。在氢化可的松的干预下这两种细胞表达TLRs明显不同，在人角膜上皮细胞系氢化可的松能促进大多数TLRs mRNA的表达，特别是TLR2，3，4，9；而在人角膜成纤维细胞却表现为明显抑制TLRs mRNA的表达。荧光免疫组织化学和western blot也表明氢化可的松能促进人角膜上皮细胞系TLR2，3，4，9在蛋白水平的表达，但是在人角膜成纤维细胞却表现为抑制TLR2，3，4，9在蛋白水平的表达。ELISA结果表明氢化可的松能促进人角膜上皮细胞系IL-6在培养液中的释放，同时抑制IL-8的释放；而在人角膜成纤维细胞IL-6，8均表现为明显的抑制。
结论：TLR1-10在人角膜上皮细胞系和角膜成纤维细胞均有表达，不同TLRs受体在同一细胞表达量不同，而各受体在不同细胞的表达也不同；氢化可的松能调控人角膜上皮细胞系和角膜成纤维细胞TLRs在mRNA和蛋白水平的表达，也能调控TLRs下游细胞因子IL-6，8的释放，但是对人角膜上皮细胞系TLRs表现为轻度促进，而对角膜成纤维细胞TLRs表现为抑制，氢化可的松促进人角膜上皮细胞系TLRs的表达和功能暗示了糖皮质激素在天然免疫方面的一个新的功能，提示糖皮质激素在角膜不同细胞发挥不同的免疫作用，其中对角膜上皮可能具有免疫增强功能 |
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| 会议投稿录入：jinxiuming 责任编辑：毛进 |
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