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| 脱细胞真皮胶原体外交联的初步研究 |
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作者：顾建军 … 文章来源：广州中山眼科中心 点击数：1852 更新时间：2007/5/31 21:13:08 
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| 目的
研究碳化二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚氨（NHS）对脱细胞真皮胶原的交联效果，找出最适合的交联条件。
方法
将未交联的脱细胞真皮分别放入EDC对COOH的摩尔比分别设定在5:1，4:1，3:1，2:1，1:1的EDC和EDC与NHS混和的溶液中，同时对溶液设置不同的pH值，金属离子，反应时间等参数。以样品收缩转变温度，扫描电镜组织学检查，材料含水量分析，样品力学性能，体外胶原酶消化溶解试验来测定脱细胞真皮的交联程度。
结果
扫描电镜外观显示经EDC处理的脱细胞真皮表现为材料表面的微孔结构有部分出现了塌陷。经EDC和NHS处理的脱细胞真皮表面的微孔结构基本得到了保留，内部的层样网状结构也没有得到破坏。不同浓度的EDC(按浓度递增)交联材料的含水量分别为85.2±3.5％，99.4±4.1％，91.6±2.8％，71.3±3.6％，69.8±4.3％。 经EDC交联的脱细胞真皮其转变温度（TS）对pH值的变化表现得并不敏感，其收缩转变温度在72～74℃之间变化。相比较经EDC和NHS处理的脱细胞真皮对pH值的变化就表现为有一定的依从性，pH值为5.0时其转变温度为76℃，而pH值为6.0～6.5时转变温度上升到了一个平台约为83℃。在同样的pH值和交联时间的条件下，加入了EDC的脱细胞真皮（其EDC/COOH为1:1）其转变温度从为处理的57℃上升到了68℃，随着EDC/COOH分子比增加到5:1，其交联温度并没有显著的增加，只是到达了73℃的平台。而随着NHS的加入，在EDC/COOH为1:1时其转变温度就达到了78℃，随着分子比的增加，当达到5:1时，转变温度维持在了83℃的水平。Fe3+离子可提高转变温度从而增加交联度，Na+, Ca2+离子的存在对转变温度并无较大的影响，而Zn2+离子的存在可使经各种交联剂交联的材料的转变温度降低。未经交联剂处理的脱细胞真皮（TS为56℃）经胶原酶消化8小时后几乎完全消失，而经EDC处理的脱细胞真皮（TS为66℃）经胶原酶消化8小时后仍残余约76％的重量。经EDC和NHS处理的两组脱细胞真皮（TS为77℃和83℃）消化8小时后的残余量分别为94％和95％。拉力试验经4h胶原酶消化后未交联的脱细胞真皮（TS为56℃）已丧失拉力，而经EDC处理的（TS为66℃）还剩余20％的拉力，经EDC和NHS处理的脱细胞真皮（TS为77℃和83℃，EDC/COOH分子比为1:1和5:1）其残余拉力则分别为原来的61％和86％。
结论
EDC和NHS的联合作用提高了对脱细胞真皮胶原的交联速率和交联程度，同时交联的材料有较好的柔韧性。体外试验表明在酶降解过程中可保留较高的抗张强度。
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| 会议投稿录入：gujianjun 责任编辑：毛进 |
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