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| 人视网膜前体细胞移植于缺血损伤大鼠视网膜下腔的存活与分化 |
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作者：康前雁1、… 文章来源：1西安交通大学医学院第一附属医院眼科 2西安交通大学医学院神经生物研究所 710061 点击数：928 更新时间：2007/5/31 23:29:47 
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| 目的：研究人视网膜前体细胞在视网膜缺血损伤大鼠视网膜下腔的存活与分化，探讨视网膜前体细胞作为种子细胞行视网膜移植的可行性。方法：体重200-250g健康雄性SD大鼠，以左眼为实验眼，前房生理盐水灌注，使眼压相当于110mmHg (1mmHg=0.133kPa)，维持60min，制成急性高眼压视网膜缺血再灌注损伤模型。右眼为对照眼仅行前房穿刺。人视网膜前体细胞来源于7-20周人工流产胚胎眼神经视网膜组织。收集第二代对数生长期细胞，采用磷酸钙转染法将绿荧光蛋白EGFP质粒基因细胞转染48h，调整细胞浓度为2×105/100ul。采取外路经巩膜行视网膜下腔细胞移植。于移植后1天、7天、14天、28天取双侧眼球，行连续冰冻切片。荧光显微镜下观察移植细胞在眼内的存活与迁徙。采用荧光免疫细胞化学染色方法，激光共聚焦显微镜下观察移植细胞在眼内的分化。结果：转染EGFP人视网膜前体细胞在缺血损伤成年大鼠视网膜下腔移植术后1天、7天、14天和28天，均可在宿主视网膜内观察到成簇和散在分布的绿色荧光细胞。绿荧光细胞数量随时间延长而减少。转染细胞少量分布于宿主视网膜外层和视网膜下腔，在宿主视网膜其它层中未观察到明显的荧光标记的细胞。术后7天，荧光标记细胞主要分布于宿主视网膜外层，较多细胞仍在视网膜下腔中；术后14天，少数荧光标记的细胞进入宿主视网膜外核层，多数细胞仍位于视网膜下腔，此时视网膜下腔间隙变小；术后28天，少量散在分布荧光标记的细胞位于视网膜外层和视网膜下腔，部分细胞聚集在一起。免疫荧光化学染色显示转染EGFP人视网膜前体细胞在缺血损伤成年大鼠视网膜下腔移植术后7天和28天，移植细胞表达Nestin、Pax6、Map2、GFAP、Thy-1、Rhodopsin等细胞标志蛋白。结论：人视网膜前体细胞能够在视网膜缺血损伤成年大鼠视网膜下腔存活并向视网膜外层迁徙，具有向神经元、星型胶质细胞及视网膜特定细胞-节细胞和杆细胞分化的能力。提示人视网膜前体细胞可作为视网膜移植的干细胞来源。 |
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| 会议投稿录入：kangqy 责任编辑：毛进 |
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