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POAG患者与正常人小梁网细胞ATP、ROS的对比研究 |
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| POAG患者与正常人小梁网细胞ATP、ROS的对比研究 |
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作者：何媛 葛坚… 文章来源：眼科学国家重点实验室 中山大学中山眼科中心 点击数：1023 更新时间：2007/6/4 10:04:56 
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| 目的：研究POAG患者与正常人小梁网细胞内ATP与ROS的差异。
方法：组织块培养法培养原代正常人与POAG患者小梁细胞；应用流式细胞仪以及激光共聚焦显微镜检测小梁细胞内ROS水平、线粒体膜电位变化情况；活细胞及HE染色后光镜下各加药组细胞的形态学观察；应用生物化学发光技术检测细胞内ATP产量；紫外分光光度计检测线粒体呼吸链复合物活性；Annexin Ⅴ- FITC及LDH试剂盒检测细胞损伤。
结果：POAG患者小梁细胞内ROS水平显著高于正常对照组(n=20,P<0.05)；线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抑制剂ROT、TTFA、AM、MYX处理实验组POAG以及正常对照组人眼小梁细胞后，POAG-ROT处理组ROS产生明显增多(n=25, P<0.05)；POAG-TTFA、AM、MYX处理组ROS水平均未见显著改变(n=25, P>0.05)；经过FCCP、VitE以及NAC处理均可以抑制POAG组和POAG-ROT组ROS的产生；光镜观察下POAG-ROT处理组小梁细胞较正常对照组明显缩小，细胞死亡数量增多，细胞密度降低，而POAG-TTFA/AM/MYX、POAG-ROT-FCCP、POAG-ROT-VitE、POAG-ROT-NAC、POAG-ROT-ArA/CyA组小梁细胞形态以及数量未见明显改变；POAG组小梁细胞线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性下降、ATP产生减少，差异有显著性(n=20, P<0.05)；POAG组和POAG-ROT组小梁细胞线粒体膜电位显著下降(n=23, P<0.05)，而FCCP、ArA、CyA可以抑制其下降；POAG-ROT组小梁细胞凋亡及死亡高于HTM-ROT组及POAG组(n=30,P<0.05)，并且可以被抗氧化剂VitE和及NAC和线粒体膜电位抑制剂FCCP及ArA、CyA抑制。
结论：POAG患者小梁网细胞线粒体功能受损，能量代谢下降，线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性下降引起细胞内ROS产生增加，其抑制剂ROT通过线粒体应激途径增加ROS的产生进而诱导细胞凋亡及死亡。推测POAG患者小梁细胞线粒体功能下降出现提前老化现象。
本课题受以下基金资助：国家自然科学基金项目（No.30271386、No.30300380、No.30400486）；卫生部临床学科重点项目（No.3030902005）；广东省自然科学基金项目（No.36649、No.021823） |
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| 会议投稿录入：lbqmac 责任编辑：毛进 |
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