目的:利用活体共聚焦激光显微镜,结合分子生物学,免疫组织化学等检测方法研究兔LASIK术后MMP-2和MMP-9与角膜愈合的相关性,基质金属蛋白酶抑制剂是否会影响角膜创伤愈合反应,探讨LAISK术后角膜愈合的机制。方法:40只新西兰白兔双眼行LASIK治疗,分为对照组(右眼)和GM6001治疗组(左眼),于术后1天,3天,7天,1月和3月取材,共聚焦激光显微镜检查并记录角膜基质细胞数,碎片数和内皮细胞数,ELISA检测角膜组织中MMP-2和MMP-9的含量,明胶酶谱法检测角膜组织中MMP-2和MMP-9的表达活性。结果: LASIK术后不同时间点实验组角膜基质细胞减少值和碎片数值均小于对照组(F=4.511,P<0.05; F=5.001,P<0.05),MMP-2和MMP-9的含量实验组均小于对照组(F=4.171,P<0.05;F=5.508,P<0.05),MMP-2和MMP-9的活性实验组均小于对照组(F=4.012,P<0.05;F=3.822,P<0.05)。MMP-2和MMP-9的含量与角膜基质细胞减少值和碎片数值分别具有相关性(r=0.65,P<0.05 ;r=0.58,P<0.05;r=0.42,P<0.05;r=0.31,P<0.05),MMP-2和MMP-9的活性与角膜基质细胞减少值和碎片数值分别具有相关性(r=0.58,P<0.05 ;r=0.52,P<0.05;r=0.39,P<0.05;r=0.28,P<0.05)。LASIK术后3个月对照组仍可见MMP-2在角膜上皮层和基质层表达,实验组仅在角膜上皮层可见。 结论:1、MMP-2和MMP-9与LASIK术后基质细胞减少值,基质层碎片数呈正相关,MMP-2和MMP-9 可能起到抑制角膜愈合的作用。2、基质金属蛋白酶抑制剂GM6001可以抑制LASIK术后MMP-2和MMP-9的表达和活性,从而促进角膜愈合。
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