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复方水蛭滴眼液和阿魏酸钠对紫外线照射的人晶状体上皮细胞抗氧化酶的影响         
复方水蛭滴眼液和阿魏酸钠对紫外线照射的人晶状体上皮细胞抗氧化酶的影响
作者:严京1,祁… 文章来源:北京市石景山区鲁谷路9号中国中医科学院眼科医院,100040 点击数:1256 更新时间:2007/6/11 9:49:42
目的:复方水蛭滴眼液(compound Shui Zhi eye drop,SZ)和阿魏酸钠(sodium Ferulate,SF)防护紫外线(ultraviolet, UV)照射的人晶状体上皮细胞(human lens epithelia cell, HLEC)氧化损伤的作用。 方法:本研究采用人晶状体上皮B3细胞系进行实验。细胞系细胞经过复苏和传代培养,取生长状态良好的细胞随机进行分组,以吡喏克辛滴眼液(pirenoxine solution,PS)作为阳性对照,分为对照组、UV组、SZ组、SF组和PS组。将细胞传代于细胞培养皿中,待细胞生长至80% 融合时,加入无血清DMEM培养24h,使细胞转入G0期。分别将SZ、SF和PS加入培养皿与HLEC于培养箱中共同孵育4h,贴壁细胞表面的培养液厚度为1mm。UV照射时打开平皿盖,避光暗处UV照射3.5h后,于培养箱中继续培养4h后收集细胞进行指标检测。①我们将采用化学比色法检测HLEC内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-px),过氧化氢酶(Catalase,CAT)的含量变化。探讨SZ、SF和PS抗HLEC氧化损伤作用及酶学机制。②采用反转录聚合酶链式反应技术(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)分析HLEC内SOD、GSH-px,CAT的信使RNA(messager RNA, mRNA)表达,从基因水平探讨SZ、SF和PS防护HLEC氧化损伤的机制。 结果:①超氧化物歧化酶(SOD)活性变化:UV组HLECSOD活性17.31±2.36比对照组25.63±1.98显著降低(P<0.01);SZ组和SF组酶活性比UV组均升高,SZ组升高显著(P<0.05),SF组升高具有统计学意义(P<0.01)。PS组与UV组相比没有统计学意义(P >0.05)。谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性变化:UV组GSH-px活性2.04±0.32比对照组3.99±0.52显著降低(P<0.01)。SZ组、SF组和PS组酶活性与UV组相比较均有升高,其中SZ组升高非常显著(P<0.01),SF组比PS组升高显著(P<0.05=。过氧化物酶(CAT)活性变化:UV组CAT活性1.42±0.45比对照组5.08±0.5显著降低(P<0.01)。SZ组、SF组和PS组酶活性与UV组相比均有明显升高(P<0.01)。SZ组、SF组和PS组组间比较无明显差异。② SODmRNA表达:UV组HLEC中SODmRNA表达下降,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。SZ组和SF组的SODmRNA表达均显著高于UV组(P<0.01)。PS组的SODmRNA表达与UV组没有统计学意义(P>0.05)。SF组显著高于PS组(P<0.05)。GSH-px mRNA表达:UV组HLEC中GSH-px mRNA表达下降,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。SZ组和SF组的GSH-px mRNA表达均显著高于UV组,具有统计学意义(P<0.01)。PS组的GSH-px mRNA表达显著高于UV组(P<0.05)。SZ组和SF组均显著高于PS组(P<0.01)。 结论:UV照射可引起HLEC氧化损伤。SZ、SF和PS可减轻HLEC氧化损伤,SZ和SF减轻氧化损伤的作用比PS更强。SZ和SF减轻UV照射引起的HLEC氧化损伤的机制是通过提高HLEC抗氧化酶SOD、GSH-px,CAT含量及其mRNA水平。
会议投稿录入:aya610    责任编辑:毛进 
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