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| 肝细胞生长因子对晶状体上皮细胞抗凋亡作用信号通路的研究 |
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作者：安小玲 张… 文章来源：哈尔滨爱尔眼科医院眼科 150076 点击数：975 更新时间：2007/6/12 14:01:19 
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| 目的:研究HGF对晶状体上皮细胞抗凋亡作用，探讨PI3K信号转导途径在HGF对人晶状体上皮细胞的抗凋亡作用中的机制，从而寻找有效抑制剂阻止后发性白内障的发生。方法: 1.冻存的人晶状体上皮细胞复苏后，用含10%的胎牛血清与100U/ml青霉素、100ug/ml链霉素及1.9g/ml HEPES的DMEM培养基，37℃、5%CO2的培养条件下培养，取对数生长期的细胞用于实验。2、DNA ladder 检测细胞凋亡。人晶状体上皮细胞在放线菌素D（50ng/ml），放线菌素D（50ng/ml）+HGF（100ng/ml）诱导12小时后，提取总DNA，琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder。3、Western blot 检测caspase-3 的蛋白表达。人晶状体上皮细胞在放线菌素D（50ng/ml），放线菌素D（50ng/ml）+HGF（100ng/ml）诱导12小时，检测HGF对人晶体上皮细胞caspase-3 蛋白表达的影响。4、检测PI3K/AKT途径参与HGF的抗凋亡作用。(1)DNA ladder 分析放线菌素D（50ng/ml）+HGF（100ng/ml）+PI3K抑制剂Ly294002（20 μM/L）诱导12小时，LY294002对HGF的抗凋亡作用的影响。 (2)Western blot 检测人晶体上皮细胞在HGF（100ng/ml），HGF（100ng/ml）+Ly294002（20 μM/L）诱导1小时后，Bcl-2的蛋白表达水平变化、AKT及p-AKT的蛋白表达水平变化。结论: HGF对人晶状体上皮细胞有抗凋亡的作用，PI3K/AKT途径参与HGF的抗凋亡作用。
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| 会议投稿录入：aya610 责任编辑：毛进 |
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