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色素上皮衍生因子对视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50增殖、分化及凋亡的影响         
色素上皮衍生因子对视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50增殖、分化及凋亡的影响
作者:刘国颖,… 文章来源:中山大学中山眼科中心 510060 点击数:1453 更新时间:2007/6/13 19:10:20
目的:研究色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)对体外培养的视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50增殖、分化及凋亡的作用,了解PEDF对视网膜母细胞瘤治疗价值。方法:用不同浓度的PEDF作用于SO-Rb50细胞48h,采用甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活性;用1nM PEDF处理SO-Rb50细胞7天后转移到用多聚赖氨酸包被的六孔板中再继续培养10天,设立对照组,倒置显微镜观察细胞形态变化,免疫组化法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)及神经纤维微丝蛋白(NF)表达;用200nM PEDF处理SO-Rb50细胞24h,同时设立阴性对照组、阳性对照组,用流式细胞仪、Annix V-FITC/PI法检测细胞凋亡。结果:PEDF各浓度处理组吸光度值(OD)与对照组相比无明显差异(p>0.05);SO-Rb50细胞接种于用多聚赖氨酸处理的六孔板后,细胞开始贴壁呈单层贴壁或局部小团状或花环状生长,细胞逐渐由圆形向梭形生长,伸出伪足样细小的突起,成团生长的细胞于边缘处见细胞伸出突起。随着培养时间的延长,突起逐渐变粗变长;而对照组仅在贴壁早期部分出现突起,中晚期并无继续分化的趋势。诱导前后SO-Rb50细胞均表达NSE和NF,分化后的细胞较分化前表达明显增强;200nM PEDF处理组凋亡细胞分数为3.3%,与阴性对照组(2.5%)相比无明显差异,而与阳性对照组(14.1%)相比,有明显差异。结论:PEDF无直接抑制SO-Rb50细胞增殖和诱导其凋亡的作用,但PEDF可以诱导SO-Rb50细胞向神经元细胞分化,伴有成熟神经元标志NSE和NF表达的增强。因此PEDF可能通过诱导分化作用而起到间接抑制视网膜母细胞瘤生长的作用。
会议投稿录入:lgy    责任编辑:毛进 
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