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| Toll样受体在视网膜色素上皮细胞内的表达和功能研究 |
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作者：王宜强1,… 文章来源：山东省眼科研究所 266071 点击数：1666 更新时间：2004/5/30 
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| 目的 视网膜色素上皮（RPE）细胞是血-视网膜屏障的重要组成部分，参与维持视网膜正常生理功能。在老年黄斑变性等疾病中，RPE细胞的结构和功能都发生改变。目前不少证据表明老年黄斑变性的发病机理可能涉及视网膜和脉络膜界面的免疫反应，而Toll样受体(TLRs)在机体免疫反应中的地位正受到重视。本文研究了RPE细胞内TLRs的表达和功能。方法 从胎儿RPE细胞在体外应用滤膜培养体系获得成熟分化的单层RPE细胞，或应用从成人供体眼球收集的RPE细胞。用基因芯片、RT-PCR、Western blot、免疫组化、流式细胞技术等方法检测TLRs的表达。用不同的TLRs配体刺激RPE细胞后不同时间，应用半定量RT-PCR和ELISA方法检测细胞因子表达的改变，用酶促化学反应法和流式细胞技术检测细胞的生长。结果 RT-PCR方法表明用滤膜培养体系或常规培养瓶体系培养的胎儿RPE细胞转录表达所有TLRs (TLR1-TLR10)和相关分子如MyD88、CD14；从不同成人个体获得的RPE细胞则表达不同的TLRs mRNA组合；用Western blot 和免疫组化方法可分别在胎儿RPE细胞和成人眼球RPE细胞层检测到TLR2的的表达；用PGN、LTA、SLP （均为TLR2特异性配体）和LPS（TLR2、TLR4配体）处理体外培养的高度分化RPE细胞，可用RT-PCR方法检测到IL6、MIP3、IL1等因子的表达上调，用ELISA方法可检测到IL6向培养液中的分泌，且诸因子上调幅度与配体浓度呈剂量依赖关系；分别检测滤膜培养体系中RPE细胞表面层和基底层培养液中IL6，发现IL6向表面层定向分泌，且RPE细胞对来自表面层的刺激反应更快；TLRs配体刺激不能改变RPE细胞的生长速度，也不能诱导凋亡。结论 RPE细胞表达TLRs，且对TLRs配体刺激产生反应，提示RPE细胞具有免疫调节功能。 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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