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视网膜移植后结构和功能的重建         
视网膜移植后结构和功能的重建
作者:彭清1,2,… 文章来源:河北医科大学第二医院眼科 河北省石家庄市和平西路215号,0500000 点击数:1255 更新时间:2007/6/18 8:38:44
目的:探索胚胎大鼠视网膜片层移植到视网膜退行性变性S334ter-line-3大鼠视网膜下间隙后其受体鼠视网膜视觉传导功能的重建和供受体之间突触连接的形成。方法:用特制的视网膜移植工具将胎龄为19天Long-Evans转基因大鼠视网膜片层(带有人类胎盘碱性磷酸酶阳性基因,hPAP阳性基因)和相同大小的琼脂胶薄切片分别移植到鼠龄为30天的视网膜退行性变性S334ter-line-3大鼠左眼视网膜下间隙(实验组n=8,对照组n=8),术后7天,21天,30天和90天进行OCT检测,以确定移植物的存在及位置;术后30天和90天对移植成功的大鼠(实验组n=6,对照组n=6)从其视上丘记录移植后视觉传导功能的重建并从光镜,电镜和免疫组织化学染色中观察供体组织在视网膜下间隙的存活发育及与受体之间形成的突触连接。 结果 从OCT检测中发现: 每组中有6例手术移植成功,即在受体视网膜下间隙可发现移植物的存在。从视上丘检测移植后视觉传导功能的恢复中发现,实验组在低光刺激时即可在视上丘相应于视网膜移植的部位记录到其局部视刺激反应,而无视网膜移植的部位及对照组不能记录到任何光刺激反应。从光镜和电镜的结果显示:移植物不仅可在视网膜下间隙存活发育,而且随移植后时间的延长大部分可在视网膜下间隙形成平行板层排列且带有正确极性,少部分形成玫瑰花环结构。用免疫组织化学法对80um厚的视网膜移植切片染色后可见:带有hPAP阳性基因的移植物被染成深棕色易于与染成浅黄色的宿主视网膜相鉴别。电镜结果表明,移植物感光细胞外节呈叠状排列,与宿主RPE细胞形成良好连接,内节发育较短,排列有序,与内界膜紧密结合,在外丛状层可见许多发育良好三联体结构的移植物感光细胞终端突起;部分标本可见高电子密度移植物与低电子密度宿主之间形成良好的突触连接,连接缝隙被胶质细胞突起充填,同时,可见少许移植物组织穿透突触连结界线膜进入到受体视网膜的内核层。结论:胎龄为19天转基因大鼠视网膜片层移植到视网膜退行性变性S334ter-line-3大鼠视网膜后,经OCT及光镜和电镜的检测其在视网膜下间隙不仅可存活发育而且与宿主之间可形成良好突触连接,并且在移植区可检测到视觉电生理传导的重建,这就为视网膜移植在人类的应用奠定了临床实验基础。
会议投稿录入:aya610    责任编辑:毛进 
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