目的 观察大鼠视网膜缺血再灌注损伤(retina ischemia-reperfusion injury,RIR)中视网膜细胞的凋亡情况。方法 利用前房高眼压灌注,造成大鼠视网膜缺血60min,然后恢复其供血,并分别于再灌注12、24、48h、7d后处死大鼠,摘取眼球作视网膜组织石蜡切片,用核苷酸末端转移酶介导的dUTP末端标记法(terminal deoxynucleotidyl-transferase mediated dUTP nick end-labeling,TUNEL),亲和素-生物素-过氧化物酶技术(avidinbiotin-peroxidase complex technique,ABC)分别检测视网膜细胞的凋亡情况和P53蛋白的表达分布状况,同时对视网膜凋亡细胞进行计数并作统计学分析。结果 RIR12、24、48h,7d天后视网膜凋亡细胞数(每高倍视野均数)分别为9.2±0.912、25.6±1.625、12.1±1.609、0.02±0.141。RIR24h组,P53蛋白表达阳性。凋亡细胞及P53阳性蛋白均出现在内核层(inner nuclear layer,INL)及神经节细胞层(ganglion cell layer,GCL),而外核层(outer nuclear layer,ONL)几乎无阳性表达。结论 RIR中视网膜内层细胞存在着明显的凋亡征象。尤以RIR24h组最为显著。 |