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角膜缘慢周期细胞特性的研究         
角膜缘慢周期细胞特性的研究
作者: 陈文生,… 文章来源:天津医科大学眼科中心 300070 点击数:1516 更新时间:2007/6/18 11:50:12
目的: 尽管角膜缘干细胞在角膜新陈代谢和肿瘤形成过程中起着重要作用,但是目前对 其生理特性所知甚少。本次研究的目的是根据表达major histocompatibility complex(MHC) class II、ABCG2和细胞形状来确定角膜缘慢周期细胞特性。 方法: Wistar大鼠腹腔按每100g体重5mg的剂量连续注射5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) 2周。经4周无BrdU间隔后,摘出眼球,分离角膜组织,并对其进行ABCG2、MHC classII和BrdU双重免疫组织化学染色,在激光共焦点显微镜下检查染色的角膜组织。 在另外一个实验系列,正常角膜组织进行ABCG2、Keratin 14、Keratin 3、CD11c和 MHC class II双重染色。另外,用Dispase II把正常角膜组织处理成上皮片并经胰蛋白 酶消化成单个细胞。对游离细胞进行ABCG2和MHC class II双重染色。用共焦点显微镜 测量角膜缘上皮ABCG2+细胞的大小和核对细胞质的比率(nucleus-to-cytoplasm [N/C] ratio),并与角膜周边上皮细胞和角膜中心上皮细胞相比较。 结果: 表达ABCG2的BrdU染色保留细胞(label-retaining cells [LRCs])分布在角膜缘 上皮基底层,在角膜上皮的其他部位未发现其存在。大约20%的角膜缘染色保留细胞表 达MHC class II抗原。角膜上皮所有的MHC class II+细胞均表达树状细胞的表示物, CD11c。将正常角膜组织进行ABCG2和Keratin 14双重染色表明,大约五分之四的ABCG2 阳性表达Keratin 14,但不表达Keratin 3,推测这些细胞属于未分化的上皮细胞。游 离细胞免疫组织学染色表明,角膜缘上皮内存在有少量细胞形状较小、N/C高、表达 ABCG2和MHC class II抗原的Langerhans cells细胞。 结论: 正常角膜缘上皮基底层存在有形状小、高N/C、表达ABCG2的慢周期细胞。一些 角膜缘上皮慢周期细胞表达MHC class II抗原。这些发现对我们理解角膜缘上皮慢周期 细胞的特性提供了实验依据。
会议投稿录入:aya610    责任编辑:毛进 
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