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| Real-time PCR 检测晶状体转录调控基因的表达 |
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作者：王晔 黄… 文章来源：山东省眼科研究所，青岛市燕儿岛路5号，266071 点击数：1312 更新时间：2007/6/19 15:03:48 
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| 目的：通过Real-time PCR方法检测Pax6(5a)，Pax6，Prox1，Sox1与Sox2在晶状体发育过程中起重要作用的转录调控基因在不同年龄的正常人晶状体中的表达情况。
方法：收集临床上自然流产胎儿的晶状体和来源于眼库的正常人的晶状体，分别提取总RNA，反转录为cDNA，采用TaqMan探针法，以GAPDH为管家基因，进行相对定量的Real-time PCR检测，观察Pax6(5a)，Pax6，Prox1，Sox1，Sox2基因随年龄变化的表达情况。结果分为两部分，第一部分为胎儿组，分别为胎龄小于5月，胎龄5月，胎龄7月；第二部分为成人组，分别为27岁，35岁，50岁，58岁。利用软件SPSS 10.0 进行统计学分析。以p≤0.05视为差异具有显著性。
结果：对各年龄段正常晶状体行Real-time PCR检测，结果显示各年龄段Pax6(5a)，Pax6，Prox1，Sox1，Sox2基因表达量强弱不等。胎儿组随胎龄增加，Pax6(5a)， Prox1，Sox1基因表达量无显著变化，Sox2与 Pax6基因在胎龄5月时表达量显著增加（p≤0.05），胎龄7月时又降至与胎龄5月时相当（Fig.1）。成人组Pax6(5a)，Pax6的表达量无显著变化，Prox1与Sox2基因随年龄增加表达量增高，差异显著（p≤0.05）（Fig.2）。
结论：晶状体在不同的发育时期受不同的转录调控基因作用。Pax6基因是晶状体蛋白基因和其他转录因子的主要调控者。Prox与Sox对于晶状体纤维细胞的分化非常重要。本研究发现胎儿期与成人期这些重要转录因子的表达量发生了改变，其改变的原因还需要在后续实验中进一步研究。
Fig. 1 晶状体转录调控基因在胎儿期的表达
Fig. 2 晶状体转录调控基因在成人期的表达
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| 会议投稿录入：aya610 责任编辑：毛进 |
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