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LEDGFp52对RGCs无血清Neurobasal培养上清SOD活性和MDA含量的影响研究         
LEDGFp52对RGCs无血清Neurobasal培养上清SOD活性和MDA含量的影响研究
作者:赵海生 … 文章来源:重庆 第三军医大学西南眼科医院 重庆 400038 点击数:2036 更新时间:2007/6/20 16:05:09
目的 明确LEDGFp52是否是通过抗氧化途径而对RGCs起到保护作用。 方法 无血清的Neurobasal培养体系培养RGC, 在此基础上分为实验组和对照组,实验组在大鼠RGCs培养36h后分别将LEDGFp52(2×10-4g/L)和Ab-LEDGF(2.5×10-4g/L)加入RGCs的无血清培养基中,在LipofectamineTM2000介导下将Ad-LEDGFp52(2.5×10-4g/L)(3×10-4pfu/L) 和siRNA-LEDGFp52(6×10-4g/L)转染进RGC。设阳性对照组CNTF(10-4g/L)和空白对照组(不加任何处理因素),四个观察时相点为在给予处理因素后的24h、48h、72h和96h。对照组及实验组的每组检测孔数为6孔,重复测量3次。OX法检测RGCs培养上清SOD酶活性,TBA法检测RGCs培养上清MDA含量。实验数据采用 表示,SPSS13.0统计软件进行多变量方差分析中重复测量方差分析验后的多重比较t检验。 结果 在LEDGFp52基因和蛋白两个水平正负双向调控下,RGC无血清的Neurobasal培养上清中SOD活性的变化比MDA含量的变化要小,但仍旧能观察到方向相反的变化趋势。LEDGFp52在蛋白水平减轻RGC无血清的Neurobasal培养基中自由基对RGC的攻击效应主要发生在中期;LEDGFp52在基因水平减轻RGC无血清的Neurobasal培养基中自由基对RGC的攻击效应主要发生在中期及后期。 结论 LEDGFp52在基因和蛋白水平对RGC生长的调控可能不是通过清除超氧阴离子自由基的抗氧化机制来发挥的。RGC无血清的Neurobasal培养基有一定的稳态自控能力。
会议投稿录入:aya610    责任编辑:毛进 
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