人工视神经促进视神经再生的研究 方媛 莫晓芬 孙兴怀 郭文毅 田洁 张萌 董京艳 上海复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科(200031) 目的：探讨CNTF基因活体转染视网膜视神经节细胞（retinal ganglion cells, RGCs）联合移植人工神经导管能否促进成年大鼠的视神经再生。方法：构建CNTF-GFP质粒，用电穿孔法将其转染入雪旺细胞中，并以RT-PCR及免疫组化检测其CNTF表达情况。在成年大鼠玻璃体内注射CNTF质粒，并以电穿孔法辅助转染到RGCs，7天后将大鼠球后视神经切断并在断端缝接一根长1.1cm的人工神经导管（由转染CNTF基因的雪旺细胞填充在PLGA导管中所构成）。4周后，行DiI逆行标染标记轴突再生的RGCs并计数。行人工视神经导管冰冻切片，免疫组化标染神经特异性标记物NF, 再生相关蛋白GAP-43、NCAM。电镜观察再生轴突的超微结构。结果：RT-PCR及免疫组化证实雪旺细胞电穿孔转染基因后CNTF表达增加，视网膜铺片可见被DiI标染RGCs, 且实验组明显多于对照组。人工视神经切片中可见GAP-43, NF染色阳性的再生神经纤维，且NCAM的表达也明显增加。电镜观察证实人工神经导管中存在再生神经纤维。结论：CNTF基因活体转染RGCs并联合人工神经导管移植能够促进成年大鼠视神经的再生。本研究受国家自然科学基金（30300379）资助。
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