骨髓间充质干细胞分化为角膜上皮样细胞的体内外研究
顾绍峰1 洪晶2
1中国医科大学附属第一临床医院眼科 沈阳 110001
2 北京大学第三医院 北京大学眼科中心 北京 100083
【摘要】目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)向角膜上皮细胞分化的可行性。方法:体外分离培养兔骨髓间充质干细胞(Rb-MSCs)和兔角膜缘干细胞(Rb-LSCs),BrdU标记Rb-MSCs。在体部分,制作兔眼碱烧伤模型,将BrdU标记的Rb-MSCs胶原膜移植到兔角膜表面。术后28天取角膜组织行HE、BrdU和细胞角蛋白3(CK3)染色。离体部分,取标记的Rb-MSCs,在4种不同条件下诱导培养3天后,用免疫荧光和流式细胞术检测Rb-MSCs在不同时间点CK3的表达情况。结果:在体部分,碱烧伤兔角膜呈白色混浊,表层和基质层均可见大量血管。Rb-MSCs移植28天后,角膜表面粗糙程度减轻,但混浊和新生血管未见明显改善。角膜上皮CK3染色阳性,部分BrdU+的细胞表达CK3。离体部分,4组Rb-MSCs中均有部分细胞分化为具有角膜上皮细胞形态的细胞,并表达CK3。流式分析的结果表明各组CK3表达量在第二天均升高,但在第3天均有所降低,且各组间无统计学差异。结论:MSCs可以在体内外诱导分化为角膜上皮样细胞,EGF是参与这一分化过程的重要因子之一。
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