目的 检测乳化-内部凝胶化制得的海藻酸钙-壳聚糖内皮抑素(Endostatin, ES)微囊的体外释放情况,球周注射后眼内组织分布情况。方法 采用乳化-内部凝胶化方式制备微囊,紫外分光光度法、考马斯亮兰法、免疫组化、Elisa法、Western-blot法检测ES分布、浓度和蛋白表达。32只SD大鼠随机分4组,每组8只,A组:微囊化ES组,球周注射微囊化ES 20uL(2.5mg/ml);B组:单纯ES组,球周注射ES蛋白20uL(2.5mg/ml);C组:空微囊组,球周注射空微囊20uL;D组:生理盐水组,球周注射生理盐水20uL。结果 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可见ES蛋白条带,3、7、14、21d各时点上清液中ES蛋白质浓度逐渐增加。A组:移植后7、14 d,在外核层,、视细胞层、RPE 层均见ES蛋白阳性表达;B组:7d 时,以上组织可见ES蛋白阳性表达,14d后无蛋白阳性表达; C组和D组7、14 d以上组织均未见ES蛋白阳性表达。球周注射微囊化ES 7、14 d,眼球组织匀浆ES蛋白浓度分别为(63.16 ±7.64)ng/眼和(33.2 ±5.77)ng/眼。结论 微囊化ES具有缓控释功能,球周注射微囊化ES,ES能穿过巩膜壁并分布在视网膜各层组织,微囊对机体无明显的毒副作用。
[关键词] 乳化-内部凝胶化;海藻酸钙-壳聚糖微囊; 内皮抑素;球周注射
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