| 目的：比较不同渗透压的保存液中21天人角膜上皮细胞的形态学改变和凋亡。方法：新鲜的人角膜组织保存在300mOsm/L改良保存液和350mOsm/L保存液中7，14和21天。提取上皮细胞的RNA检测SPRRs, tranglutaminase 1, and MAPK JNK1 and 2。H&E染色电子显微镜下观察形态学变化。PRR2, tranglutaminase 1, ZO-1 and caspase 3免疫荧光染色评估紧密连接的完整性及凋亡。结果：在改良保存液中，完整性保持14天。原保存液中14天已丧失其完整形态。SPRR蛋白表达在改良保存液中14天内随时间而增加；原保存液中7天内增加后骤减。tranglutaminase 1结论相同。ZO-1表达在改良保存液中14天和原保存液中7天均减少。两种保存液中caspase 3均从细胞核转移到细胞浆，在原保存液中表达更强烈。JNK1 and 2 mRNAs在两种保存液中均随时间而增加，JNK1 mRNA在原保存液中更明显，而JNK2 mRNA在改良保存液中更明显。TG1 mRNA在两种保存液中14天达到峰值，在改良保存液中更明显。SPRR2A and 1B mRNAs在改良保存液中持续增加；原保存液中7天内增加后骤减。结论：原保存液7天后人角膜上皮凋亡，而改良保存液减少凋亡，增加CE产物使其完整性维持14天。这些发现有利于临床应用。 |
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