异种脱细胞角膜基质制备方法的筛选
杜立群 吴欣怡
通讯作者:吴欣怡,Email: xywu8868@163.com
山东大学齐鲁医院眼科,济南,250012
目的:筛选脱细胞处理猪角膜基质的最佳方法,为组织工程化人工角膜的构建提供理想的载体材料。方法:应用反复冻融及不同的去污剂(0.25%、0.5%及1%的曲拉通-100, 十二烷基磺酸钠, 脱氧胆酸和CHAPS)联合蛋白酶抑制剂处理新鲜猪角膜,12h、24h、36h、48h、72h、96h分别取样本行组织学检查,选取脱细胞较彻底的方法行生物力学性能检测。结果:0.5%及1%十二烷基磺酸钠处理24h均可完全脱除猪角膜基质的细胞成分,组织学检查证实基质细胞完全脱除、胶原纤维排列整齐、保留完整的前、后弹力层,而其他方法、浓度及时间不能有效脱除细胞成分。0.5%十二烷基磺酸钠处理24h组最大机械拉伸力与正常猪角膜相比无统计学差异(p>0.05),而1%十二烷基磺酸钠处理24h组最大机械拉伸力与正常猪角膜相比有统计学差异(p<0.05)。结论:0.5%十二烷基磺酸钠处理24h能有效去除异种角膜基质细胞成分并保留其组织结构及良好的生物力学性能,因而是制备脱细胞猪角膜基质材料的理想方法。
关键词:组织工程;角膜;脱细胞;猪 |