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| 携带K5基因突变体的腺病毒构建及K5蛋白表达 |
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作者：刘岩 文章来源：上海市乌鲁木齐中路12号复旦大学附属华山医院 点击数：1089 更新时间：2008/1/6 
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目的 对血管生成抑制因子纤溶酶原Kringle 5（K5）基因进行突变，构建于重组腺病毒中，并观察突变后K5蛋白的表达情况。方法 用重叠延伸技术对K5基因Furin蛋白酶水解识别位点进行定点突变，分别构建携带K5基因和突变后的K5m基因表达框的腺病毒载体Ad-EF1a-K5/K5m；用RT-PCR法比较腺病毒感染TC-1细胞后K5和K5m Mrna的表达；用免疫沉淀和Western blot法比较腺病毒感染TC-1细胞后K5蛋白和突变后K5蛋白的表达。结果 成功对K5基因进行点突变，携带K5突变基因腺病毒K5蛋白表达量明显多于携带未突变K5基因腺病毒。 结论 对K5基因Furin蛋白酶水解识别位点进行定点突变能提高腺病毒介导的K5蛋白分泌表达量，为进一步以腺病毒为载体携带K5基因在眼部新生血管异常增生性疾病的实验研究提供基础。
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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