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IFN-λ1基因在大肠杆菌中的表达及其对角膜基质细胞的抗病毒作用研究         
IFN-λ1基因在大肠杆菌中的表达及其对角膜基质细胞的抗病毒作用研究
作者:过钦群 文章来源:苏州市立医院本部眼科 点击数:1245 更新时间:2008/2/2
目的:获取IFN-λ1的原核表达产物并研究其对兔角膜基质细胞的抗单纯疱疹病毒 (HSV) 作用。方法:用含基因重组表达载体pGEX-4T-λ1的大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达和包涵体提取纯化后获取IFN-λ1蛋白,采用微量滴定法测定其效价。采用组织块培养法培养兔眼角膜基质细胞,用微量细胞病变法比较IFN-λ1、IFN-α对兔眼角膜基质细胞的抗单纯疱疹病毒作用。结果:重组菌BL21经诱导后,蛋白电泳显示相对分子量约为33kDa 的蛋白条带;用IFN-α标准品校正其效价为62 .5 IU/ml。125/2、125/4、125/8 IU/ml的IFN-α标准品、IFN-λ1均分别可抗32、16、8 TCID50HSV-I的感染。125/2、125/4、125/8 IU/ml的IFN-α标准品分别可抗16、8、4TCID50HSV-II的感染;125/2、125/4、125/8 IU/ml的IFN-λ1分别可对抗8、4、2TCID50HSV-II的感染。结论:重组菌BL21,经IPTG诱导表达和包涵体提取纯化后可获得IFN-λ1,它对兔眼角膜基质细胞有一定的抗单纯疱疹病毒作用。hIFN-λ1抗HSV-I的作用与IFN-α相近;hIFN-λ1抗HSV-II的作用比IFN-α约弱一倍。关键词:hIFN-λ1;原核表达;角膜基质细胞;抗病毒。
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