| 目的 探讨CA4P对体外培养的人晶状体上皮细胞（HLECs）增殖过程的影响 方法 本实验设空白对照组、阴性对照组及不同浓度的CA4P实验治疗组。空白对照组为培养于不含碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的普通培养液中的HLECs，阴性对照组为培养于含有bFGF的培养液中的HLECs，实验组为不同浓度（1，5，10，15nmol/L）的CA4P作用于培养于含有bFGF的培养液中的HLECs。分别于培养24，48，72h后MTT法检测在不同时间点各组HLECs增生情况、流式细胞仪测定其细胞周期分布情况、Western blot测定其细胞周期依赖性激酶抑制因子 (p21)在蛋白质水平表达量的改变 结果 MTT检测显示CA4P浓度≥1nmol/L对体外 HLECs增生的抑制作用呈时间和剂量依赖性。CA4P作用48h后,各药物浓度组(1，5，10，15nmol/L)细胞生长抑制率分别为12.08%、23. 56%、27.72%和 38.43%,流式细胞仪检测显示 CA4P可阻滞 HLECs由 G0/G1期向 S期转换 ,使 G0/G1期细胞增多, S期细胞减少。经 10nmol/L CA4P作用 48 h, G0/G1期及 S期细胞比例分别为 (86.20±4. 30) %和 (8.05±1.53) %,与阴性对照组 [(54.86±1.86) %和 (36.75±1.18) % ]比较差异具有统计学意义 (P <0.05)。Western blot检测发现 CA4P可促进 p21蛋白质水平的表达。CA4P处理48h后,各组平均灰度比值分别为 0.674±0.062(5nmol/L)和 0.937±0. 151(10nmol/L),与阴性对照组(0.314±0.026)比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论 CA4P可以通过促进p21表达,使 HLECs阻滞于G0/G1期,最终抑制 HLECs增生。 |
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